產(chǎn)品詳情
知益科技采用的微球合成技術(shù)可規(guī)�；苽渚郾揭蚁�/二乙烯基苯和聚甲基丙烯酸酯為基質(zhì)的兩種性能互補(bǔ)的高性能聚合物反相色譜填料，這些填料具有剛性強(qiáng)、粒徑均一、低反壓、耐酸堿等特點(diǎn)。知益科技聚合物反相色譜填料具有不同的粒徑規(guī)格（3μm、5μm、10μm、15μm、20μm、25μm、30μm、40μm和50μm）和優(yōu)化的孔徑結(jié)構(gòu)（100Å、300Å、500Å和800Å四種孔徑）以及無(wú)孔結(jié)構(gòu)，可以滿足從實(shí)驗(yàn)室分析到大規(guī)模工業(yè)分離的各種需求，如產(chǎn)物、抗生素、有機(jī)化合物、多肽、蛋白質(zhì)和寡核苷酸等藥物分子的分離。
聚合物反相色譜填料的特點(diǎn)：
· 球形，粒徑高度均一
· 化學(xué)穩(wěn)定性高和寬pH值范圍（pH=1-14）
· 優(yōu)化的孔徑結(jié)構(gòu)
· 高比表面積和高載量
· 機(jī)械強(qiáng)度高
· 低反壓、柱效高
· 不同極性基質(zhì)的選擇
粒徑高度均一
控制微球的粒徑和均一性對(duì)色譜應(yīng)用至關(guān)重要，因?yàn)槲⑶虻牧胶土椒植纪ǔ？梢詻Q定柱效。在色譜分離中，溶質(zhì)的縱向擴(kuò)散是色譜帶和色譜峰拓寬的主要原因。對(duì)于特定大小的微球，采用均一微球裝填的色譜柱可以有效地縮窄色譜帶和色譜峰，還可以獲得低的反壓，從而使這些色譜柱呈高柱效和高分辯率。
知益科技可以提供從1.7μm到100μm范圍內(nèi)任意大小、粒徑均一的聚合物反相色譜填料，客戶可以任意選擇，知益能夠根據(jù)客戶的需求定制。圖1顯示了 KBsphere®系列聚合物反相色譜填料不同粒徑大小的掃描電鏡圖，從圖中可以看出，知益科技的聚合物反相色譜填料的粒徑高度均一。
采用Beckman Coulter Counter測(cè)量知益科技聚合物反相色譜填料的粒徑分布，如圖2所示，填料的變異系數(shù)即CV<3%。結(jié)果表明知益科技的聚合物反相色譜填料具有高度的均一性，達(dá)到了NIST標(biāo)準(zhǔn)顆粒的粒徑分布要求。
圖1. 聚合物反相色譜填料不同粒徑大小的掃描電鏡圖
圖2. 聚合物反相色譜填料的粒徑分布圖
優(yōu)化的孔結(jié)構(gòu)
微球的孔徑大小與色譜填料的比表面積有很大的關(guān)系，孔徑越小則比表面積越大。目標(biāo)分離物質(zhì)為小分子，通常選擇孔徑小的色譜填料；目標(biāo)分離物質(zhì)為生物大分子，則選擇孔徑較大的色譜填料。對(duì)于特定的目標(biāo)分離物質(zhì)，選擇優(yōu)化的孔徑結(jié)構(gòu)色譜填料不僅可以增加上樣量，而且還可以提高分離純度。
知益科技可以提供不同孔徑大小的色譜填料，包括100Å、300Å、500Å和800Å四種孔徑。圖3為知益科技的四種不同孔徑大小的均一聚合物反相色譜填料的掃描電鏡圖。
圖3. 不同孔徑大小的均一聚合物色譜填料的掃描電鏡圖
批次間的穩(wěn)定性
知益科技采用的聚合物微球規(guī)�；a(chǎn)技術(shù)，能確保色譜填料的批次穩(wěn)定性。我們對(duì)每批次產(chǎn)品的性能（如粒徑大小和粒徑分布等）都進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。圖4顯示了不同批次的填料產(chǎn)品性能，說(shuō)明了我們規(guī)�；a(chǎn)的填料具有良好的穩(wěn)定性。圖5顯示了18批次的填料應(yīng)用于蛋白的分離純化，色譜圖進(jìn)一步說(shuō)明了我們的色譜填料批次間的穩(wěn)定性。
圖4：不同批次的填料產(chǎn)品的粒徑大小和粒徑分布的穩(wěn)定性
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色譜柱： |
4.6 mm I.D. x 250 mm, KBsphere® 10PS-300 |
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流動(dòng)相 A： |
0.1%三氟乙酸的水溶液 |
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流動(dòng)相 B： |
0.1%三氟乙酸的乙腈溶液 |
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梯 度： |
20%B到40% B，20 min； 40% B，10 min |
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流 速： |
1 ml/min；80%B到95%B，10min |
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檢測(cè)波長(zhǎng)： |
UV @ 280nm |
圖5. 色譜填料分離蛋白18批次的重現(xiàn)性
化學(xué)穩(wěn)定性高
知益科技的KBsphere® 系列聚合物反相色譜填料是由高交聯(lián)的聚苯乙烯/二乙烯基苯或者是高交聯(lián)的聚甲基丙烯酸酯組成，其在全pH值范圍（pH 1-14）內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。在極端的酸性溶液（如1M HCl）或極端的堿性溶液（如1M NaOH）和有機(jī)溶劑（包括乙醇、甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、DMSO、四氫呋喃等）中都可以保持微球的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定和性能的穩(wěn)定性。
不同極性色譜填料的選擇
知益科技的KBsphere® 系列聚合物反相色譜填料是由高交聯(lián)的聚苯乙烯/二乙烯基苯或者是高交聯(lián)的聚甲基丙烯酸酯組成。通過(guò)調(diào)節(jié)不同基質(zhì)的比例，知益科技可以提供不同極性的聚合物反相色譜填料，包括KBsphere® PS，KBsphere® PSM和KBsphere® PMM三種不同極性的填料，填料的極性逐步增強(qiáng)。
反壓低、高柱效
知益科技的KBsphere® 系列聚合物反相色譜填料的粒徑高度均一、剛性強(qiáng)，因此，填裝后的色譜柱的柱床穩(wěn)定，反壓低。KBsphere® 10PS-300色譜填料的塔板數(shù)可以達(dá)到50000 N/m。
色譜填料的多種選擇
純化工藝基本分為粗提、中間純化和精細(xì)純化等三個(gè)分離步驟。知益科技的KBsphere® 系列聚合物反相色譜填料可以提供從樣品的粗提、中間純化和精細(xì)純化整個(gè)分離過(guò)程的選擇。
粗提：是指從樣品中捕獲目標(biāo)成分，初步分離目標(biāo)物，屬于低分辨率的分離純化，純度一般能達(dá)到70~90%。可選擇100微米的KBsphere® 系列色譜填料。
中間純化：是指從捕獲到的目標(biāo)物中除去大部分雜質(zhì)，屬于中高等分辨率的分離純化，純度能達(dá)到90~98%。可選擇30微米或40微米的KBsphere® 系列色譜填料。
精細(xì)純化：是指目標(biāo)物達(dá)到預(yù)期的純度，除去與目標(biāo)物結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)，屬于高分辨率的分離純化，純度能達(dá)到98~99%以上�？蛇x擇10微米的KBsphere® 系列色譜填料。
聚合物反相填料分離純化案例
胰島素的分離純化
知益科技開(kāi)發(fā)了一整套完整的胰島素分離純化工藝，成功的將胰島素粗品從45%一步純化到99%。
制備條件：
儀器：高壓設(shè)備
上樣量：100mg/ml
檢測(cè)：214nm
萬(wàn)古霉素的分離純化
知益科技對(duì)萬(wàn)古霉素的分離純化建立了一套完整的純化工藝，成功的將萬(wàn)古霉素粗品從85%一步純化到98%以上，收率達(dá)到70%以上。
制備條件：
儀器：中壓設(shè)備
上樣量：100mg/ml
檢測(cè)：280nm
KBsphere® PS40-300填料技術(shù)參數(shù)
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檢測(cè)項(xiàng)目 |
技術(shù)指標(biāo) |
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填料基質(zhì) |
PS/DVB微球 |
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微球粒徑 (μm) |
40 ± 2 |
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CV值 |
< 3% |
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交聯(lián)度 |
80% |
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孔徑 (Å) |
300 |
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pH值范圍 |
1-14 |
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外觀、色澤 |
球形，白色或淡黃色 |
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干粉堆積密度（g/ml） |
0.25-0.30 |
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比表面積（m2/g） |
800 |
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孔容（ml/g） |
1.5 |
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胰島素動(dòng)態(tài)載量（mg/ml） |
50 |
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金屬離子含量 |
<10 ppm |
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大壓力 |
100 bar |
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化學(xué)穩(wěn)定性 |
幾乎適用于所有溶劑（包括：純水、異丙醇、乙醇、乙腈、1M HCl、1M NaOH；甲醇等。 |
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填料的清洗 |
聚合物反相填料可以在線清洗或轉(zhuǎn)移到容器中處理。可用非極性逐漸增強(qiáng)的溶劑清洗色譜填料，也可以采用堿洗。建議0.1-0.5M NaOH 60%甲醇溶液沖洗，再用0.1-0.5M HCl 60%甲醇溶液沖洗，然后用流動(dòng)相平衡。 |
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儲(chǔ)存 |
20%乙醇 |
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保存條件 |
室溫 |
表1: 聚合物反相色譜填料產(chǎn)品
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產(chǎn)品名稱 |
粒徑（μm） |
孔徑（Å） |
介質(zhì)組成 |
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KBsphere® 1.7PS |
1.7 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 3PS |
3 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 5PS |
5 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 10PS |
10 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 15PS |
15 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 20PS |
20 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 25PS |
25 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 30PS |
30 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 40PS |
40 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
|
KBsphere® 50PS |
50 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 60PS |
60 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 100PS |
100 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 200PS |
200 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
PS/DVB |
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KBsphere® 10PSM |
10 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 15PSM |
15 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
|
KBsphere® 20PSM |
20 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 30PSM |
30 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 40PSM |
40 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 50PSM |
50 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
|
KBsphere® 60PSM |
60 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 100PSM |
100 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 200PSM |
200 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Poly DVB/acrylate |
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KBsphere® 10PMM |
10 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 15PMM |
15 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
|
KBsphere® 20PMM |
20 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 30PMM |
30 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 40PMM |
40 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 50PMM |
50 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 60PMM |
60 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 100PMM |
100 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
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KBsphere® 200PMM |
200 |
無(wú)孔, 100, 300, 500, 800 |
Polyacrylate |
